オスミウム染色

osmium staining

SEMを用いて高分子や生物試料を反射電子像で観察する場合、その成分や組織を構成する元素の原子番号が近いため明瞭なコントラストがつきにくい。このような場合に、重金属であるオスミウムで、特定の成分や組織を染色して高いコントラストを付ける手法。
染色は、試料を四酸化オスミウムの水溶液に浸漬、もしくはその水溶液の蒸気雰囲気下に置く方法でおこなわれる。染色によってオスミウムが、高分子材料のブタジエンや生物試料のリン脂質などに含まれる炭素の二重結合を切断し、その部位に結合する。その結果、原子番号が大きいオスミウムによって染色された部位の反射電子が増加し、特定の成分や組織が明瞭に観察されるようになる。
オスミウムは毒性が強く、蒸気を吸い込んだり溶液が皮膚に触れたりすると危険なため、使用する場合は、試薬メーカーから出されている安全データシート (Safety Data Sheet, SDS) に基づいて、ドラフト内で手袋を着用して取り扱う必要がある。

In the backscattered electron imaging of high polymers and biological specimens using SEM, it is difficult to acquire a high contrast image because the atomic numbers of the constituent elements are close to each other. In such cases, a technique of Osmium (a heavy metal) staining of the specific components or tissues is used to obtain their high contrast images.
The staining is performed by immersing a specimen in a solution of osmium tetroxide or is placed in a vapor environment of the solution. By staining, osmium breaks the double bond of carbon in butadiene (high polymer material) or in phospholipid (biological specimen) and binds to the sites. As a result, the number of backscattered electrons from the sites stained by osmium of high atomic number increases and the specific components or tissues are clearly observed.
Osmium is highly toxic and it is very dangerous if an operator breathes the vapor of osmium tetroxide or contacts the solution on their skin. So when using osmium, it is requisite to wear gloves in a draft chamber under the guide of the Safety Data Sheet (SDS) issued by reagent manufacturers.